فلۇئورېسسېنسىيە سۈزگۈچ فلۇئورېسسېنسىيە مىكروسكوپتىكى كەم بولسا بولمايدىغان تەركىب.تىپىك سىستېمىدا ھاياجانلىنىش سۈزگۈچ ، بۇلغىما قويۇپ بېرىش سۈزگۈچ ۋە قوش ئەينەكتىن ئىبارەت ئۈچ ئاساسىي سۈزگۈچ بار.ئۇلار ئادەتتە كۇبقا قاچىلانغان بولۇپ ، گۇرۇپپا مىكروسكوپقا قىستۇرۇلىدۇ.
فلۇئورېسسېنسىيە سۈزگۈچ قانداق ئىشلەيدۇ؟
ھاياجانلىنىش سۈزگۈچ
ھاياجانلىنىش سۈزگۈچلىرى مەلۇم دولقۇن ئۇزۇنلۇقىنىڭ يورۇقىنى تارقىتىدۇ ۋە باشقا دولقۇن ئۇزۇنلۇقىنى توسىدۇ.ئۇلار سۈزگۈچنى تەڭشەش ئارقىلىق ئوخشىمىغان رەڭ ھاسىل قىلىشقا ئىشلىتىلىدۇ ، پەقەت بىرلا رەڭگە ئېرىشەلەيدۇ.ھاياجانلىنىش سۈزگۈچ ئاساسلىق ئىككى خىل بولىدۇ - ئۇزۇن ئۆتۈشمە سۈزگۈچ ۋە بەلۋاغ پاس سۈزگۈچ.ھاياجانلاندۇرغۇچى ئادەتتە فتوروفور سۈمۈرگەن دولقۇن ئۇزۇنلۇقىدىن ئۆتىدىغان بەلۋاغ سۈزگۈچ بولۇپ ، باشقا فتور فېرمېنسىيىلىك مەنبەلەرنىڭ ھاياجانلىنىشىنى ئەڭ تۆۋەن چەككە چۈشۈرۈپ ، فلۇئورېسسېنسىيە قويۇپ بېرىش گۇرۇپپىسىدىكى ھاياجانلىنىش نۇرىنى توسىدۇ.رەسىمدىكى كۆك سىزىقتا كۆرسىتىلگەندەك ، BP 460-495 ، يەنى ئۇ پەقەت 460-495nm لىك فلۇئورېسسېنسىيەدىن ئۆتەلەيدۇ.
ئۇ فلۇئورېسسېنسېنلىق مىكروسكوپنىڭ يورۇتۇش يولىغا ئورۇنلاشتۇرۇلغان بولۇپ ، فتوروفور ھاياجانلىنىش دائىرىسىدىن باشقا ، نۇر مەنبەسىنىڭ بارلىق دولقۇن ئۇزۇنلۇقىنى سۈزۈۋالىدۇ.سۈزگۈچ ئەڭ تۆۋەن يوللاش رەسىملەرنىڭ يورۇقلۇقى ۋە پارلاقلىقىنى بەلگىلەيدۇ.ھەر قانداق ھاياجانلىنىش سۈزگۈچتە كەم دېگەندە% 40 يوللاش تەۋسىيە قىلىنىدۇ ، بۇنداق بولغاندا يەتكۈزۈش ئەڭ ياخشىسى% 85.ھاياجانلىنىش سۈزگۈچنىڭ كەڭلىكى پۈتۈنلەي فتوروفور ھاياجانلىنىش دائىرىسى ئىچىدە بولۇشى كېرەك ، بۇنداق بولغاندا سۈزگۈچنىڭ مەركىزى دولقۇن ئۇزۇنلۇقى (CWL) فتوروفورنىڭ چوققا ھاياجانلىنىش دولقۇنىنىڭ ئۇزۇنلۇقىغا يېقىنلىشىشى كېرەك.ھاياجانلىنىش سۈزگۈچ ئوپتىكىلىق زىچلىق (OD) تەگلىك رەسىم قاراڭغۇلىقىنى بەلگىلەيدۇ.OD سۈزگۈچنىڭ توك يەتكۈزۈش دائىرىسى ياكى كەڭ بەلۋاغنىڭ سىرتىدىكى دولقۇن ئۇزۇنلۇقىنى قانچىلىك دەرىجىدە توسىدىغانلىقىنى ئۆلچەيدىغان ئۆلچەم.ئەڭ تۆۋەن OD 3.0 تەۋسىيە قىلىنىدۇ ، ئەمما 6.0 ياكى ئۇنىڭدىن يۇقىرى بولغان OD كۆڭۈلدىكىدەك.
بۇلغىما سۈزگۈچ
بۇلغىما سۈزگۈچ ئەۋرىشكە ئارقىلىق لازىملىق فلۇئورېسسېنسىيەنىڭ تەكشۈرگۈچكە يېتىشىگە شارائىت ھازىرلاپ بېرىدۇ.ئۇلار قىسقا دولقۇن ئۇزۇنلۇقىنى توسىدۇ ھەمدە ئۇزۇن دولقۇن ئۇزۇنلۇقىغا يەتكۈزەلەيدۇ.سۈزگۈچ تىپى يەنە بىر سان بىلەن مۇناسىۋەتلىك ، مەسىلەن رەسىمدىكى BA510IF (توساق توسۇش سۈزگۈچ) ، بۇ بەلگە ئەڭ چوڭ يەتكۈزۈشنىڭ% 50 لىك دولقۇن ئۇزۇنلۇقىنى كۆرسىتىدۇ.
ھاياجانلىنىش سۈزگۈچىگە ئوخشاش تەۋسىيەلەر بۇلغىما قويۇپ بېرىش سۈزگۈچلىرىگە ماس كېلىدۇ: ئەڭ تۆۋەن يەتكۈزۈش ، كەڭ بەلۋاغ كەڭلىكى ، OD ۋە CWL.كۆڭۈلدىكىدەك CWL ، ئەڭ تۆۋەن يەتكۈزۈش ۋە OD بىرىكمىسى بولغان بۇلغىما سۈزگۈچ ئەڭ يورۇق سۈرەتلەرنى تەمىنلەيدۇ ، ئەڭ چوڭقۇر توسۇلۇش بولىدۇ ھەمدە ئەڭ ئاجىز بۇلغىما سىگنالىنى بايقاشقا كاپالەتلىك قىلىدۇ.
Dichroic Mirror
ئىككى قۇتۇپلۇق ئەينەك 45 سېلسىيە گرادۇسلۇق ھاياجانلىنىش سۈزگۈچ بىلەن بۇلغىما سۈزگۈچنىڭ ئوتتۇرىسىغا قويۇلغان بولۇپ ، قويۇپ بېرىش سىگنالىنى تەكشۈرگۈچكە يەتكۈزگەندە فتوروفورغا بولغان ھاياجانلىنىش سىگنالىنى ئەكىس ئەتتۈرىدۇ.كۆڭۈلدىكىدەك قوش سۈزگۈچ ۋە نۇر دەستىسى پارچىلىغۇچنىڭ ئەڭ چوڭ ئەكس ئەتتۈرۈش بىلەن ئەڭ چوڭ يەتكۈزۈش ئارىلىقىدا ئۆتكۈر ئۆتكۈنچى باسقۇچ بار ، ھاياجانلىنىش سۈزگۈچىنىڭ كەڭ بەلۋاغنىڭ% 95 ئەكىس ئېتىشى ۋە بۇلغىما سۈزگۈچنىڭ كەڭ بەلۋاغنىڭ تارقىلىش نىسبىتى% 90.فتوروفورنىڭ كېسىشمە دولقۇن ئۇزۇنلۇقى (λ) بىلەن سۈزگۈچنى تاللاڭ ، سەرگەردان نۇرنى ئەڭ تۆۋەن چەككە چۈشۈرۈپ ، فلۇئورېسسېنسىيە رەسىم سىگنالى بىلەن شاۋقۇن نىسبىتىنى ئەڭ يۇقىرى چەككە يەتكۈزۈڭ.
بۇ رەسىمدىكى ئىككى قۇتۇپلۇق ئەينەك DM505 ، شۇڭا 505 نانومېتىر دولقۇن ئۇزۇنلۇقى بۇ ئەينەكنىڭ ئەڭ چوڭ يەتكۈزۈلۈش نىسبىتىنىڭ% 50 ىدە بولىدۇ.بۇ ئەينەكنىڭ توك يەتكۈزۈش ئەگرى سىزىقى 505 nm دىن يۇقىرى يۇقىرى سۈرئەتلىك يەتكۈزۈشنى ، 505 نانومېتىرنىڭ سول تەرىپىگە ئۇدۇل تۆۋەنلەش ۋە 505 نانومېتىرنىڭ سول تەرىپىدىكى ئەڭ چوڭ نۇر قايتۇرۇش ئىقتىدارىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ ، ئەمما يەنىلا 505 nm دىن تۆۋەن توك يەتكۈزۈش ئىقتىدارى بولۇشى مۇمكىن.
ئۇزۇن ئۆتكەل بىلەن بەلۋاغ پاس سۈزگۈچنىڭ قانداق پەرقى بار؟
فلۇئورېسسېنسىيە سۈزگۈچنى ئۇزۇن يول (LP) ۋە بەلۋاغ ئېغىزى (BP) دىن ئىبارەت ئىككى خىلغا بۆلۈشكە بولىدۇ.
ئۇزۇن ئۆتۈشمە سۈزگۈچ ئۇزۇن دولقۇن ئۇزۇنلۇقى تارقىتىدۇ ۋە قىسقالىرىنى توسىدۇ.كېسىلگەن دولقۇن ئۇزۇنلۇقى چوققا يەتكۈزۈشنىڭ% 50 تىدىكى قىممەت بولۇپ ، كېسىلگەن ئۈستىدىكى بارلىق دولقۇن ئۇزۇنلۇقى ئۇزۇن يول سۈزگۈچ ئارقىلىق يەتكۈزۈلىدۇ.ئۇلار كۆپ خىل ئەينەك ۋە بۇلغىما سۈزگۈچتە ئىشلىتىلىدۇ.ئۇزۇن ئۆتۈشمە سۈزگۈچ قوللىنىشتا ئەڭ يۇقىرى بۇلغىما قويۇپ بېرىشنى تەلەپ قىلغاندا ۋە سپېكترا كەمسىتىشنى ئارزۇ قىلمايدىغان ياكى زۆرۈر بولمىغان ۋاقىتتا ئىشلىتىش كېرەك ، بۇ ئادەتتە تۆۋەن دەرىجىدىكى تەگلىك ئۆزلۈكىدىن تۆۋەن دەرىجىدىكى ئەۋرىشكىلەردە يەككە قويۇپ بېرىدىغان تۈرنى ھاسىل قىلىدىغان تەكشۈرۈشتە بولىدۇ.
بەلۋاغ پاس سۈزگۈچ پەقەت مەلۇم دولقۇن ئۇزۇنلۇقى بەلبېغىنى تارقىتىدۇ ۋە باشقىلارنى توسىدۇ.ئۇلار پەقەت فتوروفور قويۇپ بېرىش سپېكترىنىڭ ئەڭ كۈچلۈك قىسمىنىڭ تارقىلىشىغا يول قويۇش ئارقىلىق كېسىشمە يولنى ئازايتىدۇ ، ئاپتوماتىك فلۇئورېسسېنسىيە شاۋقۇنىنى تۆۋەنلىتىدۇ ۋە شۇ ئارقىلىق ئۇزۇن يول سۈزگۈچ تەمىنلىيەلمەيدىغان يۇقىرى تەگلىك ئاپتوماتىك نۇر ئەۋرىشكىسىدىكى سىگنال بىلەن شاۋقۇن نىسبىتىنى ئۆستۈرىدۇ.
BestScope قانچە خىل فلۇئورېسسېنسىيە سۈزگۈچ توپلىمىنى تەمىنلىيەلەيدۇ؟
كۆپ ئۇچرايدىغان سۈزگۈچلەر كۆك ، يېشىل ۋە ئۇلترا بىنەپشە سۈزگۈچنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.جەدۋەلدە كۆرسىتىلگەندەك.
| Filter Set | ھاياجانلىنىش سۈزگۈچ | Dichroic Mirror | توساق سۈزگۈچ | LED چىراغ دولقۇن ئۇزۇنلۇقى | ئىلتىماس |
| B | BP460-495 | DM505 | BA510 | 485nm | · FITC: فلۇئورېسسېنسىمان ئانتىتېلا ئۇسۇلى · كىسلاتا ئاپېلسىن: DNA ، RNA · Auramine: تۇبېركۇليوز باكتېرىيەسى · EGFP, S657, RSGFP |
| G | BP510-550 | DM570 | BA575 | 535nm | · رودامىن ، TRITC: فلۇئورېسسېنسىمان ئانتىتېلا ئۇسۇلى · پرودىدىي يود: DNA · RFP |
| U | BP330-385 | DM410 | BA420 | 365nm | · ئاپتوماتىك فلۇئورېسسېنسىيەنى كۆزىتىش · DAPI: DNA داغ Hoechest 332528 ، 33342: خىروموسوم داغلاشقا ئىشلىتىلىدۇ |
| V | BP400-410 | DM455 | BA460 | 405nm | · Catecholamines · 5-گىدروكىسلىق تىرىپتامىن · Tetracycline: ئىسكىلىت ، چىش |
| R | BP620-650 | DM660 | BA670-750 | 640nm | · Cy5 · Alexa Fluor 633 ، Alexa Fluor 647 |
فلۇئورېسسېنسىيە سېتىۋېلىشتا ئىشلىتىلىدىغان سۈزگۈچ يۈرۈشلۈكلىرى ئەڭ كۆپ ئىشلىتىلىدىغان فتوروفورنى ئاساس قىلغان فلۇئورېسسېنسىيە قوللىنىشچان پروگراممىلىرىدا ئىشلىتىلىدىغان ئاساسلىق دولقۇن ئۇزۇنلۇقى ئەتراپىدا لايىھەلەنگەن.بۇ سەۋەبتىن ، ئۇلار يەنە سۈرەتكە ئېلىشنى مەقسەت قىلغان فتوروفورنىڭ ئىسمى بىلەن ئاتالغان ، مەسىلەن DAPI (كۆك) ، FITC (يېشىل) ياكى TRITC (قىزىل) سۈزگۈچ كۇبلىرى.
| Filter Set | ھاياجانلىنىش سۈزگۈچ | Dichroic Mirror | توساق سۈزگۈچ | LED چىراغ دولقۇن ئۇزۇنلۇقى |
| FITC | BP460-495 | DM505 | BA510-550 | 485nm |
| DAPI | BP360-390 | DM415 | BA435-485 | 365nm |
| TRITC | BP528-553 | DM565 | BA578-633 | 535nm |
| FL-Auramine | BP470 | DM480 | BA485 | 450nm |
| تېكساس قىزىل | BP540-580 | DM595 | BA600-660 | 560nm |
| mCherry | BP542-582 | DM593 | BA605-675 | 560nm |
فلۇئورېسسېنسىيە سۈزگۈچنى قانداق تاللايسىز؟
1. فلۇئورېسسېنسىيە سۈزگۈچنى تاللاشنىڭ پرىنسىپى فتور فېرمېنسىيىسى / قويۇپ بېرىش نۇرىنىڭ ئىمكانقەدەر تەسۋىر ھاسىل قىلىش ئۇچىدىن ئۆتۈشى ھەمدە ھاياجانلىنىش چىرىغىنى بىرلا ۋاقىتتا پۈتۈنلەي توسۇپ ، ئەڭ يۇقىرى سىگنال بىلەن شاۋقۇن نىسبىتىگە ئېرىشىش.بولۇپمۇ كۆپ فوتون ھاياجانلىنىش ۋە ئومۇمىي ئىچكى نۇر قايتۇرۇش مىكروسكوپنى ئىشلىتىش ئۈچۈن ، ئاجىز شاۋقۇنمۇ تەسۋىر ھاسىل قىلىش ئۈنۈمىگە زور دەخلى قىلىدۇ ، شۇڭا سىگنالنىڭ شاۋقۇن نىسبىتىگە بولغان تەلىپى تېخىمۇ يۇقىرى بولىدۇ.
2. فتوروفورنىڭ ھاياجانلىنىش ۋە قويۇپ بېرىش سپېكترىنى بىلىڭ.قارا تەگلىك بىلەن يۇقىرى سۈپەتلىك ، يۇقىرى سېلىشتۇرما رەسىم ھاسىل قىلىدىغان فلۇئورېسسېنسىيە سۈزگۈچ توپلاش ئۈچۈن ، ھاياجانلىنىش ۋە بۇلغىما قويۇپ بېرىش سۈزگۈچ فتوروفورنىڭ ھاياجانلىنىش چوققىسى ياكى بۇلغىما قويۇپ بېرىشىگە ماس كېلىدىغان رايونلاردا ئەڭ تۆۋەن ئۆتۈشمە يول بىلەن يۇقىرى يەتكۈزۈشنى ئەمەلگە ئاشۇرۇشى كېرەك.
3. فلۇئورېسسېنسىيە سۈزگۈچنىڭ چىدامچانلىقىنى ئويلاڭ.بۇ سۈزگۈچلەر ئۇلترا بىنەپشە نۇر (ئۇلترا بىنەپشە نۇر) ھاسىل قىلىدىغان كۈچلۈك نۇر مەنبەسىگە تەسىر يەتكۈزمەسلىكى كېرەك ، ئۇ يورۇتۇش مەنبەسىنىڭ تولۇق كۈچلۈكلۈكىگە ئۇچرىغانلىقتىن ، «كۆيۈپ كېتىش» نى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.
ئوخشىمىغان فلۇئورېسسېنسىيە ئۈلگە رەسىملىرى
مەنبەلەر توردا توپلىنىدۇ ۋە تەشكىللىنىدۇ ، پەقەت ئۆگىنىش ۋە ئالاقە ئۈچۈنلا ئىشلىتىلىدۇ.ئەگەر دەخلى-تەرۇز بولسا ، بىز بىلەن ئالاقىلىشىڭ.
يوللاش ۋاقتى: 09-دېكابىردىن 22-دېكابىرغىچە